elisa檢測試劑盒總是需要時刻保溫,主要因為ELISA屬固相免疫測定,抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)作。以抗體包被的夾心法為例,參加板孔中的標本,其間的抗原并不是都有平等的和固相抗結(jié)合的時機,只需靠近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體觸摸。這是一個逐步平衡的進程,因而需經(jīng)分散才干到達反響的終點。
在elisa檢測試劑盒中一般有兩次抗原抗體反響,即加標本和加酶結(jié)合物后??乖贵w反響的完結(jié)需求有一定的溫度和時刻,這一保溫進程稱為溫育,有人稱之為孵育.
一、沖洗式
初用于小珠載體的洗滌,洗滌液僅為蒸餾水甚至可用自來水。洗滌時附接一特殊裝置,使小珠在流水沖擊下不斷地滾動淋洗,持續(xù)沖洗 2分鐘后,吸干液體,再用蒸餾水浸泡2分鐘,吸干即可。浸泡式猶如盆浴,流水沖洗式則好比淋浴,其洗滌效果更為*,且也簡便、快速。已有實驗表明,流水沖洗式同樣也適用于微量滴定板的洗滌。洗滌時設法加大水流量或加大水壓,讓水流沖擊板孔表面,洗滌效果更佳。
二、浸泡式
1、吸干或甩干孔內(nèi)反應液;
2、用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去);
3、浸泡,即將洗滌液注滿板孔,放置1-2分鐘,間歇搖動,浸泡時間不可隨意縮短;
4、吸干孔內(nèi)液體。吸干應*,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干;
5、重復操作c和d,洗滌3-4次(或按說明規(guī)定)。在間接法中如本底較高,可增加洗滌次數(shù)或延長浸泡時間。
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